n -糖基化是蛋白質(zhì)翻譯后最重要的修飾之一。
細(xì)菌中存在胞質(zhì)可溶性n -糖基轉(zhuǎn)移酶(Cytoplasmic soluble N-glycosyltransferase, NGT),它能將不同的單糖從糖核苷酸轉(zhuǎn)移到多肽的NXS/T(X≠Pro)共識序列上。
目前報(bào)道的NGT酶可以將多種不同的糖轉(zhuǎn)移到蛋白質(zhì)中,這將導(dǎo)致糖鏈的異質(zhì)性以及糖肽類結(jié)構(gòu)和功能的復(fù)雜性和不穩(wěn)定性。
根據(jù)FuncLib算法,我們從ApNGT中獲得了底物特異性更高的突變體ApNGT- p1 (the NGT from actinobacterus pleuropneumae)。
與野生型ApNGT相比,突變型ApNGT- p1只能利用UDP-Glc作為糖供體。ApNGT-P1的**溫度為40℃左右,PBS緩沖液的**pH為7.5-8.0。ApNGT-P1對K+、Mn2+、Ca2+和Mg2+具有較好的耐受性,但受到Na+、Cu2+和Zn2+的強(qiáng)烈**。
該突變體可用于**生產(chǎn)糖基化多肽或糖基化位點(diǎn)具有均勻葡萄糖的蛋白質(zhì)。
此外,本工作為進(jìn)一步研究提高ngt供體基質(zhì)選擇性提供了可行的途徑。
UDP-L-RhaNAc | UDP-4n-D-FucNAc |
UDP-D-XylNAc | UDP-VioNAc |
UDP-2-Biotinyl-GalNAc | UDP-6-Biotinyl-GalNAc |
西安齊岳生物科技有限公司是國內(nèi)光電材料,納米材料,聚合物;化學(xué)試劑供應(yīng)商;**于科研試劑的研發(fā)生產(chǎn)銷售。供應(yīng)有機(jī)發(fā)光材料(聚集誘導(dǎo)發(fā)光材料)和發(fā)光探針(磷脂探針和酶探針)、碳量子點(diǎn)、金屬納米簇;嵌段共聚物等一系列產(chǎn)品。sjl2022/01/04