文獻:Preparation of DSPE-PEG-cRGD Modified Cationic Liposomes for Delivery of OC-2 shRNA and The Antitumor Effects on Breast Cancer
文獻鏈接:https://www.mdpi.com/1999-4923/14/10/2157
作者:by Chunyan Liu ?,Wenli Zhao ?ORCID,Ligang Zhang ?,Huamin Sun,Xi Chen andNing Deng *ORCID
裸脂質體是通過凍干基質水合(HFDM)方法制備的。將cRGD-CL(DOTAP、膽固醇、DMG-PEG2k、DSPE-PEG2k-cRGD,50:42:2:6,摩爾比)或CL(DOTAP,膽固醇、DMG-PEG 2k,50:52:8,摩爾比)的脂質分別溶解在叔丁醇中,并與等體積的過濾蔗糖溶液(15mg/mL)混合。就FITC或DiR標記脂質體而言,將0.2%摩爾比的FITC或DiR碘化物加入混合物中。
然后,在-89°C的冷凝溫度和小于0.1毫巴的壓力下,將它們快速冷凍12小時并冷凍干燥72小時(Christ ALPHA 2-4LD plus)。將凍干粉溶解在無菌水中,輕輕搖晃,形成具有多分散流體動力學直徑的脂質體。為了縮小其尺寸分布,脂質體在LiposoEasy LE-1(MoGe Machinery,Shanghai,China)中通過400nm和200nm聚碳酸酯膜擠出11次,或在冷水中用超聲波處理30分鐘。
使用Zetasizer Nano ZS90(Malvern Instruments,Malvern,UK)測量優化的空白脂質體(cRGD-CL或CL)的流體動力學直徑、多分散性(PDI)和ζ電位。通過測量在室溫下與H2O、PBS和10%FBS+DMEM孵育48小時期間的尺寸變化來評估cRGD CL的穩定性。通過透射電子顯微鏡(TEM、FEI)觀察用1%磷鎢酸負染的cRGD-CL的形態。
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