pe熒光染料的化學(xué)結(jié)構(gòu)與光學(xué)性質(zhì)

PE（phycoerythrin，藻紅蛋白）熒光染料是一種從海洋生物中提取的天然熒光蛋白，廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中。它具有獨(dú)特的光學(xué)性質(zhì)和優(yōu)良的熒光性能，是流式細(xì)胞術(shù)、熒光顯微鏡成像和免疫熒光分析中常用的標(biāo)記物之一。

一、PE熒光染料的化學(xué)結(jié)構(gòu)與光學(xué)性質(zhì)

1. 化學(xué)結(jié)構(gòu)

   - PE是一種從海洋生物（如紅藻和某些藍(lán)藻）中提取的熒光蛋白。它由多個(gè)亞基組成，每個(gè)亞基包含一個(gè)或多個(gè)發(fā)色團(tuán)，這些發(fā)色團(tuán)能夠吸收特定波長(zhǎng)的光并發(fā)出熒光。PE的分子量較大，通常在240 - 260 kDa之間。

   - PE的發(fā)色團(tuán)主要由藻紅蛋白色素組成，這些色素通過(guò)共價(jià)鍵與蛋白質(zhì)結(jié)合，形成穩(wěn)定的熒光復(fù)合物。

2. 光學(xué)性質(zhì)

   - 激發(fā)波長(zhǎng)：PE的*大激發(fā)波長(zhǎng)約為496 nm和565 nm，其中565 nm的激發(fā)效率更高。

   - 發(fā)射波長(zhǎng)：PE的*大發(fā)射波長(zhǎng)約為578 nm，呈現(xiàn)出明亮的橙紅色熒光。

   - 熒光量子產(chǎn)率：PE的熒光量子產(chǎn)率較高，通常在0.8 - 0.9之間，這意味著它能夠高效地將吸收的光能轉(zhuǎn)化為熒光。

   - 光穩(wěn)定性：PE具有良好的光穩(wěn)定性，即使在高強(qiáng)度光照射下也能保持較長(zhǎng)時(shí)間的熒光強(qiáng)度，適合長(zhǎng)時(shí)間的成像和檢測(cè)。

二、PE熒光染料的應(yīng)用

1. 流式細(xì)胞術(shù)

   - PE是流式細(xì)胞術(shù)中*常用的熒光標(biāo)記物之一。由于其發(fā)射波長(zhǎng)在578 nm，適合與流式細(xì)胞儀的氬離子激光器（488 nm）配合使用。PE標(biāo)記的抗體可以特異性地結(jié)合到細(xì)胞表面的抗原上，通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光信號(hào)，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的分選和定量分析。

   - 例如，在白細(xì)胞分型中，PE標(biāo)記的CD45抗體可以用于區(qū)分不同類型的白細(xì)胞，幫助診斷血液疾病。

2. 熒光顯微鏡成像

   - PE標(biāo)記的抗體或探針可以用于熒光顯微鏡成像，用于觀察細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)分布、細(xì)胞器定位和細(xì)胞間相互作用。由于PE的熒光強(qiáng)度高且背景低，能夠提供清晰的成像效果。

   - 例如，在研究細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路時(shí)，PE標(biāo)記的抗體可以用于檢測(cè)特定蛋白的表達(dá)和定位。

3. 免疫熒光分析

   - PE可以用于免疫熒光分析，標(biāo)記抗體或抗原來(lái)檢測(cè)樣本中的特定蛋白質(zhì)。PE標(biāo)記的抗體具有高靈敏度和特異性，能夠檢測(cè)低豐度的蛋白質(zhì)。

   - 例如，在組織切片中，PE標(biāo)記的抗體可以用于檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物的表達(dá)，幫助病理診斷。

4. 多重標(biāo)記

   - 由于PE的發(fā)射波長(zhǎng)與其他熒光染料（如FITC、PE-Cy5等）不重疊，可以與其他熒光染料同時(shí)使用，實(shí)現(xiàn)多重標(biāo)記。這使得研究人員可以在同一細(xì)胞或組織樣本中同時(shí)檢測(cè)多個(gè)靶標(biāo)。

   - 例如，在細(xì)胞周期分析中，PE標(biāo)記的抗體可以與FITC標(biāo)記的抗體同時(shí)使用，分別檢測(cè)細(xì)胞周期中的不同階段。

三、PE熒光染料的標(biāo)記方法

1. 抗體標(biāo)記

   - PE可以通過(guò)化學(xué)方法與抗體結(jié)合，形成PE標(biāo)記的抗體。常用的標(biāo)記方法包括共價(jià)結(jié)合和非共價(jià)結(jié)合。共價(jià)結(jié)合是通過(guò)化學(xué)反應(yīng)將PE與抗體的氨基酸殘基結(jié)合，形成穩(wěn)定的復(fù)合物。非共價(jià)結(jié)合則是通過(guò)物理吸附的方式將PE與抗體結(jié)合。

   - 例如，使用N-羥基琥珀酰亞胺酯（NHS）活化PE的氨基，然后與抗體的賴氨酸殘基結(jié)合，形成穩(wěn)定的共價(jià)鍵。

2. 核酸標(biāo)記

   - PE也可以用于核酸標(biāo)記。通過(guò)化學(xué)修飾，PE可以與寡核苷酸或DNA探針結(jié)合，用于檢測(cè)樣本中的特定核酸序列。

   - 例如，在熒光原位雜交（FISH）中，PE標(biāo)記的核酸探針可以用于檢測(cè)染色體上的特定基因序列。

3. 細(xì)胞標(biāo)記

   - PE可以直接用于細(xì)胞標(biāo)記。通過(guò)將PE與細(xì)胞膜上的特定受體結(jié)合，可以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的熒光標(biāo)記。例如，PE標(biāo)記的轉(zhuǎn)鐵蛋白可以用于標(biāo)記細(xì)胞表面的轉(zhuǎn)鐵蛋白受體，用于細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)。

四、PE熒光染料的優(yōu)點(diǎn)

1. 高熒光強(qiáng)度

   - PE的熒光強(qiáng)度高，能夠提供清晰的成像和檢測(cè)信號(hào)，適合低豐度靶標(biāo)的檢測(cè)。

2. 良好的光穩(wěn)定性

   - PE在高強(qiáng)度光照射下仍能保持較長(zhǎng)時(shí)間的熒光強(qiáng)度，適合長(zhǎng)時(shí)間的成像和檢測(cè)。

3. 低背景

   - PE的熒光背景低，能夠提供高信噪比的成像和檢測(cè)結(jié)果。

4. 多重標(biāo)記能力

   - PE的發(fā)射波長(zhǎng)與其他熒光染料不重疊，可以與其他熒光染料同時(shí)使用，實(shí)現(xiàn)多重標(biāo)記。

五、PE熒光染料的局限性

1. 光漂白

   - 盡管PE具有良好的光穩(wěn)定性，但在長(zhǎng)時(shí)間高強(qiáng)度光照射下仍會(huì)發(fā)生光漂白，導(dǎo)致熒光強(qiáng)度下降。

2. 溫度敏感

   - PE的熒光強(qiáng)度對(duì)溫度敏感，高溫可能導(dǎo)致熒光強(qiáng)度下降。

3. pH敏感

   - PE的熒光強(qiáng)度對(duì)pH值敏感，需要在合適的pH范圍內(nèi)使用。

六、總結(jié)

PE熒光染料是一種高效、靈敏的熒光標(biāo)記物，廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中。它具有高熒光強(qiáng)度、良好的光穩(wěn)定性和低背景等優(yōu)點(diǎn)，適合多種檢測(cè)和成像技術(shù)。然而，PE也存在一些局限性，如光漂白和對(duì)溫度、pH值的敏感性。在實(shí)際應(yīng)用中，需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的標(biāo)記方法和實(shí)驗(yàn)條件，以充分發(fā)揮PE熒光染料的優(yōu)勢(shì)。

我們專注于提供多種熒光染料及其衍生試劑，涵蓋從可見(jiàn)光區(qū)到近紅外區(qū)的廣泛波段，包括FITC、Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7、Rhodamine、Alexa Fluor、Sulfo類染料等，適用于生物標(biāo)記、分子探針、成像追蹤、細(xì)胞分析、藥物遞送等多個(gè)研究領(lǐng)域。我們的熒光染料具備光穩(wěn)定性、良好的水溶性，部分產(chǎn)品還配有活性基團(tuán)（如NHS、Maleimide、Hydrazide、Azide等），便于與蛋白、多糖、脂質(zhì)或聚合物共軛。無(wú)論是基礎(chǔ)科研還是應(yīng)用開(kāi)發(fā)，我們均可提供定制服務(wù)與技術(shù)支持

廠家:西安齊岳生物科技有限公司

用途:科研

狀態(tài)：固體/粉末/溶液

產(chǎn)地:西安

溫馨提醒:僅供科研，不能用于人體實(shí)驗(yàn)!

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