Au:CdTe量子點標(biāo)記人肺**細(xì)胞A549細(xì)胞的步驟方法
Au:CdTe量子點具有優(yōu)良光學(xué)特征、較好的單分散性和結(jié)晶性,金摻雜量子點Au:CdTe具有較好的光穩(wěn)定性、細(xì)胞親和性,較小的細(xì)胞*性。利用Au:CdTe量子點熒光探針對**活細(xì)胞(A549)進(jìn)行長期無損傷標(biāo)記和熒光成像。表明Au:CdTe量子點是一種理想的生物探針,在生物標(biāo)記和熒光成像方面具有潛在的應(yīng)用價值。
量子點標(biāo)記細(xì)胞步驟如下:
1) 在6孔板上使用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)人肺**細(xì)胞A549(37C,5%CO2,細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng))。
2) 取生長至對數(shù)期的細(xì)胞培養(yǎng)板,移去培養(yǎng)基,用PBS(pH7.4)緩沖液沖洗2次。
3) 加入Au:CdTe量子點的PBS溶液(含量子點20nmol/mL),置細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育20-40min。
4)用PBS沖洗2次,每孔加1mLPBS,蓋好在6孔板上蓋。放置到倒置熒光顯微鏡觀測,并用CCD成像。
5)加入新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
6)定期移去培養(yǎng)基,換上PBS緩沖液,置熒光顯微鏡觀察。
7)觀察成像后,將PBS緩沖液換成新鮮培養(yǎng)基,平板放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng),每天用觀察熒光顯微鏡觀察成像。為了更清晰顯示量子點與細(xì)胞核的位置關(guān)系,取一部分量子點標(biāo)記的A549細(xì)胞,用Hoechst33342對細(xì)胞核染色。Hoechst33342是--種可以穿透細(xì)胞膜的DNA結(jié)合染料,和雙鏈DNA結(jié)合后,較大激發(fā)波長350nm,較大發(fā)射波長461nm(藍(lán)色)。
圖2.7Au:CdTe量子點(A-D)與CdTe(E-F)標(biāo)記的A549活細(xì)胞熒光顯微照片
左圖:(A)Au:CdTe標(biāo)記A549活細(xì)胞0.5h明場照片;(B)熒光照片示A549細(xì)胞內(nèi)少量Au:CdTe信號(桔紅);(C)Au:CdTe標(biāo)記1h的明場照片;(D)熒光照片示細(xì)胞內(nèi)大量Au:CdTe信號(桔紅);
右圖:(E)對照組CdTe標(biāo)記0.5h明場照片:(F)熒光照片,看不到CdTe信號:(G)CdTe標(biāo)記1h明場照片:(H)熒光照片示細(xì)胞內(nèi)少量CdTe信號。
量子點庫存產(chǎn)品:
量子點標(biāo)記BPA半抗原
CdTe/CdS量子點標(biāo)記嘔吐毒素抗體
紅色量子點偶聯(lián)單克隆鼠抗人CD71抗體
OTA單克隆抗體偶聯(lián)CdSe/ZnS半導(dǎo)體熒光量子點
鼠抗Cd~(2+)-IEDTA單克隆抗體偶聯(lián)CdSe/CdS量子點包載聚苯乙烯微球
鼠抗Pb~(2+)-IEDTA單克隆抗體偶聯(lián)CdSe/CdS量子點包載聚苯乙烯微球
羊抗鼠IgG偶聯(lián)近紅外發(fā)光CdTe量子點
抗γ血紅蛋白單克隆抗體偶聯(lián)水溶性CdTe量子點
抗IL-6單克隆抗體Ⅰ(Ab1,小鼠)偶聯(lián)羧基量子點(CdSe/ZeS)
兔抗豬IgG偶聯(lián)SiO2@QDs@SiO2微球
吲哚美辛量子點標(biāo)記抗卵清白蛋白抗體
PLA2R抗體偶聯(lián)抗人IgG抗體
真菌毒素單克隆抗體標(biāo)記羧基水溶性量子點
近紅外發(fā)光CdTe量子點偶聯(lián)克倫特羅抗體
CdTe/ZnS量子點標(biāo)記SMD單克隆抗體
近紅外發(fā)光CdTe量子點偶聯(lián)Brcaa1抗體
廠家:西安齊岳生物科技有限公司
以上資料來自小編axc,2022.05.11
以上文中提到的產(chǎn)品僅用于科研,不能用于人體。