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UDP糖|OcUER1和ochs1參與尾狀鳥(niǎo)苷udp - l -鼠李糖生物合成的功能分析
發(fā)布時(shí)間:2022-02-21     作者:UDP糖   分享到:

udp - l -鼠李糖(udp - l -rha)是植物合成含鼠李糖化合物的重要供糖體。在植物中,參與UDP-Rha生物合成的酶及其編碼基因卻很少。


通過(guò)RNA-Seq序列分析,從尾突鳥(niǎo)(Ornithogalum caudatum)中分離到兩個(gè)編碼鼠李糖合成酶(RhS)和雙功能的udp -4-keto-6-脫氧葡萄糖(UDP-4K6DG) 3,5 -異丙基酶/ udp -4-keto- l -鼠李糖(UDP-4KR) 4-keto-reductase (UER)的基因。


OcRhS1基因有一個(gè)2019 bp的開(kāi)放閱讀框(ORF),編碼一種三功能的RhS酶。


體外酶學(xué)檢測(cè)表明,OcRhS1可以通過(guò)三個(gè)連續(xù)反應(yīng)將UDP-D-glucose (UDP-Glc)轉(zhuǎn)化為UDP-Rha。


生物化學(xué)證據(jù)表明,重組蛋白OcRhS1在pH范圍5-11和溫度范圍0-60℃時(shí)均具有活性。


UDP-Glc中OcRhS1的Km值為1.52 × 10?4 M. OcRhS1是一個(gè)多結(jié)構(gòu)域蛋白,具有兩組輔因子結(jié)合基序。對(duì)OcRhS1的輔因子依賴(lài)性特性進(jìn)行了表征。觀察到OcRhS1的n端部分(OcRhS1- n)代謝UDP-Glc,形成中間體UDP-4K6DG。


OcUER1含有一個(gè)906 bp的ORF,編碼一個(gè)301 aa的多肽。OcUER1與OcRhS1的羧基末端結(jié)構(gòu)域(OcRhS1- c)具有很高的相似性,表明其具有將UDP-4K6DG轉(zhuǎn)化為UDP-Rha的內(nèi)在能力。


在OcRhS1-N和OcUER1的共同作用下,UDP-Glc可以被生物轉(zhuǎn)化為UDP-Rha。后來(lái)的生化化驗(yàn)證實(shí)了這一說(shuō)法。OcRhS1和OcUER1的表達(dá)譜揭示了它們可能參與了尾狀葉中含鼠李糖多糖的生物合成。

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