UDPglucose焦磷酸化酶(UTP:α-d-葡萄糖-1-磷酸尿苷基轉(zhuǎn)移酶,EC 2.7.7.9)從犢牛肝臟中部分純化。動力學(xué)性質(zhì)和UDP糖對酶的**作用通過同位素測定來確定,其中產(chǎn)物UDP-d-[14C]葡萄糖被收集并在deae -纖維素圓盤上測量。
底物UTP和葡萄糖-1- p的Michaelis-Menten常數(shù)分別為0.1 mM和0.03 mM。當(dāng)葡萄糖-1- p濃度為0.04 mM, UTP濃度為0.2 mM時,幾種UDP糖對酶有**作用。
所示濃度下的化合物和**百分率分別為0.08 mM udp -d-葡萄糖(87%)、0.45 mM udp -d-葡萄糖醛酸(56%)、0.43 mM udp -d-半乳糖醛酸(48%)、0.36 mM udp -d-木糖(32%)、0.45 mM udp -d-甘露糖(23%)和0.35 mM udp -d-半乳糖(14%)。
葡萄糖的Kt值**(0.005 mM),其次是葡萄糖醛酸(0.15 mM)、半乳糖醛酸(0.21 mM)和木糖(0.24 mM)。這四個化合物表現(xiàn)出對UTP的競爭性**和對葡萄糖-1- p的非競爭性**。這些糖核苷酸中的一個或多個可能在體內(nèi)調(diào)節(jié)udp葡萄糖焦磷酸化酶反應(yīng)。
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