UDP糖|UDP-(3-脫氧-3-氟)-d-半乳糖和UDP-(2-脫氧-2-氟)-d-半乳糖的酶法合成及底物活性與UDP-半乳糖-半乳糖變酶有關
用酶法制備了新型UDP-糖尿苷5 ' -(3-脫氧-3-氟-d-半乳糖基二磷酸)(1)和UDP-(2-脫氧-2-氟)-d-半乳糖(2),并作為UDP-半乳糖基突變酶(UDP- galp mutase EC 5.4.99.9)的底物類似物進行了測試。
用HPLC和19F NMR觀察UDP-Galp突變酶對1和2的轉化。
產物的HPLC洗脫圖譜和19F化學位移與預測的呋喃糖形式1和2的形成相一致?;衔?和2的Km值與天然底物UDP-Galp相似(1,0.2 mM, UDP-Galp為0.6 mM),但kcat值差異**(1,0.02 mM, UDP-Galp為1.6/min)。
通過1H和19F核磁共振波譜分析,還觀察到UDP-Galp突變酶轉化過程中生成的產物(UDP-Galp,化合物1或化合物2)的平衡產率與水溶液中游離糖在熱平衡時的呋喃糖含量之間存在相關性。討論了這些結果對這一異常酶促反應機理的影響。
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