定制量子點修飾(兔抗豬IgG探針）量子點修飾抗體

兔抗豬IGG H&L(HRP)是以豬IGG H&L為抗原的HRP山羊多克隆抗體，可以特異性結合豬IGG H&L。兔抗豬IGG H&L(HRP)主要用于ICC/IF,Dotblot,ELISA,IHC-P,IHC-Fr,Immunomicroscopy,WB等豬IGG H&L檢測實驗。

抗原與抗體能夠特異性結合是基于抗原決定簇（表位）和抗體超變區(qū)分子間的結構互補性與親和性。這種特性是由抗原、抗體分子空間構型所決定的。除兩者分子構型*度互補外，抗原表位和抗體超變區(qū)必須密切接觸，才有足夠的結合力。

B淋巴細胞在抗原刺激下轉(zhuǎn)化為漿細胞，產(chǎn)生能與相應抗原發(fā)生特異性結合的抗體，稱為免疫球蛋白。免疫球蛋白G（IgG）是血清中免疫球蛋白的主成分，約占血清中免疫球蛋白總含量的75%。IgG有4個亞型，即IgG1、IgG2、IgG3、IgG4。IgG是體內(nèi)*主要的抗體，具有抗病毒、中和病毒、抗菌及免疫調(diào)節(jié)的功能。

IgG也是能夠通過胎盤的抗體，在新生兒抗感染中起重要作用。有些自身抗體，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡的LE因子，抗甲狀腺球蛋白抗體也屬于IgG。檢測血清中的IgG含量，*常用的方法是單向免疫擴散法和免疫比濁法，但后者已逐漸代替前者。

檢測機體免疫球蛋白的含量可了解機體的體液免疫功能狀態(tài)，幫助診斷免疫增生、免疫缺陷、感染及自身免疫性等多種疾病，具有重要的臨床意義。

1.血清IgG增*：見于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、萎縮性門靜脈性肝硬變、慢性活動性肝炎、類風濕性關節(jié)炎、亞急性細菌性心內(nèi)膜炎、IgG型骨髓瘤、某些感染性疾病、IgG型單克隆丙種球蛋白病等。

2.血清IgG減少：見于抗體缺乏癥、免疫缺陷綜合征、非IgG型多發(fā)性骨髓瘤、重鏈病、輕鏈病、腎病綜合征、某些白血病、燒傷、變應性濕疹、天皰瘡、肌緊張性營養(yǎng)不良等。

應用

用于*鼠源單鏈抗體庫的構建及豬IgG的篩選

采用噬菌體抗體庫這一新興的生物學技術,采用未經(jīng)免疫過的小鼠,取其脾細胞提取mRNA,經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄PCR擴增出抗體重鏈和輕鏈可變區(qū)基因,大小分別為360bp和320bp左右,純化回收的VH與VL在接近等摩爾濃度下,先采用含有Linker片段的引物將Linker片段連接到VL基因片段上去,然后與VH片段組裝成單鏈抗體基因(ScFv),再用帶有限制性內(nèi)切酶位點的引物(5’端SfiI,3’端NotI)擴增ScFv基因片段,獲得大小約750bp的目的片段,純化后分別用SfiI和NotI消化,與SfiI/NotI雙酶切的載體pCANTAB-5E連接,化學法轉(zhuǎn)化大腸桿菌TGI感受態(tài)細胞。

轉(zhuǎn)化菌經(jīng)輔助噬菌體M13K07挽救后,得到*鼠源噬菌體抗體庫(Barbas et al,1993)。提取質(zhì)粒經(jīng)PCR初步鑒定,證明有外源片段插入且其大小與目的片段一致。

在成功構建*鼠源單鏈抗體庫的基礎上,以豬IgG為靶抗原對噬菌體抗體庫進行了三輪“吸附-擴增-洗脫”的富集過程,從而得到了豬IgG的次級噬菌體抗體庫。用富集后的庫液鋪板并挑取單菌落制備噬菌體抗體,進行ELISA檢測,得到了預期的效果。

關于我們： 

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以上資料來自西安齊岳生物小編ssl2021.11.12

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