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介紹量子點(diǎn)表面修飾抗體IgG、IgM、IgA、IgE、IgD抗體
發(fā)布時(shí)間:2021-11-11     作者:ssl   分享到:

介紹量子點(diǎn)表面修飾抗體IgG、IgM、IgA、IgE、IgD抗體 

量子點(diǎn)修飾IgG、IgM、IgA、IgE、IgD抗體 

免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)是廣泛存在于哺乳動(dòng)物血清、淋巴液、組織液和外分泌液中的一種具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白,在機(jī)體防御疾病的重要成分在疾病研究、**研發(fā)、疫苗評(píng)價(jià)中具有重要作用。抗體(Antibody,Ab)是B細(xì)胞接受抗原刺激后分泌的具有免疫功能的,即能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白。因此所有的抗體都是免疫球蛋白,而免疫球蛋白并不都是抗體。Ig分子由兩條相同的輕鏈(L鏈)和兩條相同的重鏈(H鏈)所組成,L鏈與H鏈由二硫鍵連接形成一個(gè)四肽鏈分子,稱為Ig分子的單體,是構(gòu)成免疫球蛋白分子的基本結(jié)構(gòu)。根據(jù)H鏈恒定區(qū)結(jié)構(gòu)的不同將免疫球蛋白分為五種:IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。

 

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量子點(diǎn)表面修飾分子偶聯(lián)服務(wù)

1、量子點(diǎn)表面修飾**小分子根據(jù)客戶需求將油溶性或水溶性**分子負(fù)載到量子點(diǎn)表面,如阿霉素、紫杉醇等。

2、量子點(diǎn)表面修飾功能性小分子:

在已有在售產(chǎn)品的基礎(chǔ)上,可根據(jù)客戶需求將生物靶向性小分子,如RGD、葉酸等,偶聯(lián)到量子點(diǎn)表面,構(gòu)建靶向納米探針。

3、量子點(diǎn)表面修飾抗體

在已有在售產(chǎn)品的基礎(chǔ)上,可根據(jù)客戶需求將生物靶向性抗體等蛋白分子,如美羅華單抗(針對(duì)CD20)、西妥昔單抗(針對(duì)EGFR)、曲妥珠單抗(針對(duì)HER2)等,偶聯(lián)到量子點(diǎn)表面,構(gòu)建靶向納米探針。

2、量子點(diǎn)表面修飾糖類小分子:

3、在已有在售產(chǎn)品的基礎(chǔ)上,可根據(jù)客戶需求將糖類小分子,如半乳糖、葡萄糖等,偶聯(lián)到量子點(diǎn)表面,構(gòu)建靶向納米探針。

針對(duì)目前量子點(diǎn)抗體偶聯(lián)物純化工藝復(fù)雜,回收率低,難以實(shí)現(xiàn)規(guī)模化生產(chǎn)的弊端,本**通過采用氨基葡萄糖封閉量子點(diǎn)與抗體偶聯(lián)物的殘留羧基,降低偶聯(lián)產(chǎn)物的表面ζ電位,通過調(diào)整溶液pH值至4.5~5.0,進(jìn)一步降低偶聯(lián)產(chǎn)物在溶液中的凈電荷含量、實(shí)現(xiàn)普通高速離心法規(guī)模化**純化量子點(diǎn)與抗體偶聯(lián)物。本**簡(jiǎn)化了量子點(diǎn)與抗體偶聯(lián)物的實(shí)驗(yàn)操作流程,降低了對(duì)分離設(shè)備的要求,適合大批量純化量子點(diǎn)IgG類單克隆抗體偶聯(lián)物,得率在85%以上,且偶聯(lián)產(chǎn)物的熒光特性以及生物活性未見明顯變化

抗微生物納米顆粒用于遞送**劑或光響應(yīng)性載體提供了抵抗傳染病的新方法。在各種納米顆粒中,熒光碳點(diǎn)由于獨(dú)特的光學(xué)性能受到廣泛關(guān)注。例如,熒光碳點(diǎn)可以作為大腸桿菌細(xì)菌成像的**熒光探針。兩親性熒光碳點(diǎn)和聚乙二醇修飾的熒光碳點(diǎn)在細(xì)菌檢測(cè)和成像熒光標(biāo)記方面也很有潛力。季銨鹽和支化聚乙烯亞胺修飾的熒光碳點(diǎn)對(duì)革蘭氏陰性和革蘭氏陽性細(xì)菌都具有良好的抗菌活性

 

硫量子點(diǎn)修飾鼠源性單克隆抗體

大量的單克隆抗體被成功制備,并被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、生物化學(xué)、藥理學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、微生物學(xué)及臨床等各個(gè)領(lǐng)域。

因此,鼠源性IgG類單克隆抗體自然而然地成為了一類**且應(yīng)用**廣泛的單克隆抗體。該類抗體不僅具有重要的科研價(jià)值,而且具有巨大的商業(yè)價(jià)值。然而,鼠源性IgG類單克隆抗體不具有類似納米材料的光、電等性質(zhì),因此在實(shí)際應(yīng)用中往往需要結(jié)合其他的一些材料,如熒光物質(zhì)、有機(jī)染料,磁性材料等。

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量子點(diǎn)(Quantum Dots, QDs)是一種由I1-VI或II1-V族元素組成的半導(dǎo)體納米晶體(Semiconductor nanocrystals),由于量子點(diǎn)的**物理尺寸,從而導(dǎo)致了一種量子限域效應(yīng),使得量子點(diǎn)顯示出具有比常規(guī)有機(jī)染料、熒光蛋白更為優(yōu)越的獨(dú)特光學(xué)性質(zhì)。**,與常規(guī)有機(jī)染料相比,量子點(diǎn)的激發(fā)光譜寬且呈連續(xù)分布,其熒光發(fā)射光譜的半寬峰高與常規(guī)有機(jī)染料相比更窄,且呈對(duì)稱分布。此外,量子點(diǎn)與常規(guī)熒光染料相比,激發(fā)和發(fā)射光譜之間的斯托克斯位移大,降低了量子點(diǎn)熒光信號(hào)的信噪比,大大提高了量子點(diǎn)的檢測(cè)靈敏度。單個(gè)量子點(diǎn)的熒光強(qiáng)度是羅丹明染料的10-100倍之間,且量子點(diǎn)的熒光發(fā)射波長(zhǎng)可通過調(diào)整量子點(diǎn)合成粒徑的大小以及材料組分進(jìn)行連續(xù)調(diào)諧,因此合成不同直徑大小的量子點(diǎn)就能獲得多種可以辨別的不同顏色熒光。由于不同尺寸大小的量子點(diǎn)能夠采用單一波長(zhǎng)的激發(fā)光產(chǎn)生不同顏色的熒光,因而可方便實(shí)現(xiàn)對(duì)生物組分的多元檢測(cè)。量子點(diǎn)與常規(guī)有機(jī)染料或熒光蛋白相比,具有較強(qiáng)的抗光漂白功能。量子點(diǎn)在連續(xù)光激發(fā)條件下,其熒光發(fā)射強(qiáng)度隨時(shí)間變化不明顯,而Alexa 488在沒有添加抗漂白劑的情況下熒光強(qiáng)度呈指數(shù)下降。總之,作為一種新型的熒光標(biāo)記物,量子點(diǎn)具有比常規(guī)有機(jī)染料以及熒光蛋白更為**的優(yōu)勢(shì),目前已廣泛應(yīng)用于細(xì)胞標(biāo)記、活體細(xì)胞成像、活體動(dòng)物體內(nèi)熒光顯微成像以及熒光標(biāo)記的免疫學(xué)快速診斷技術(shù)等領(lǐng)域。其中羧基功能團(tuán)表面的水溶性量子點(diǎn)應(yīng)用**廣泛,采用多羧基以及疏水鏈的兩性聚合物是油溶性量子點(diǎn)轉(zhuǎn)化為羧基表面的水溶性量子點(diǎn)最常用方法。然而,量子點(diǎn)并不具有抗體分子的特異性和選擇性,因此往往需要在其表面偶聯(lián)上抗體分子形成量子點(diǎn)單克隆抗體偶聯(lián)物。這樣,這種偶聯(lián)物就同時(shí)擁有了量子點(diǎn)的光學(xué)特性和抗體分子的特異性和選擇性。

水溶性羧基化量子點(diǎn)與IgG類單克隆抗體常用偶聯(lián)方法為EDC/NHSS介導(dǎo)的活潑酯方法。在水溶性羧基化量子點(diǎn)與IgG類單克隆抗體偶聯(lián)過程中,將量子點(diǎn)IgG類單克隆抗體偶聯(lián)物與溶液中游離IgG類單克隆抗體進(jìn)行**分離,是保證量子點(diǎn)IgG類單克隆抗體偶聯(lián)物廣泛使用的前提。目前,量子點(diǎn)單克隆抗體偶聯(lián)物純化方法主要包括以下幾種。

**,超速離心方法。由于·水溶性量子點(diǎn)納米粒子粒徑小,比表面積大,納米材料與單克隆抗體偶聯(lián)物表面含有大量的羧基,因此采用常規(guī)離心(低于30,000 g離心力),量子點(diǎn)單克隆抗體偶聯(lián)物回收效率普遍偏低(小于50%),若要將量子點(diǎn)單克隆抗體偶聯(lián)物回收效率提高至85%以上,離心速度一般需大于50,000 g。

**種,凝膠色譜法。該方法利用量子點(diǎn)單克隆抗體偶聯(lián)物與單克隆抗體的分子量差異(表現(xiàn)為光學(xué)以及水化粒徑的差異),利用排阻層析原理進(jìn)行分離。

第三種,超濾分離法。該法利用超濾管的超濾膜截流分子量差異將單克隆抗體與量子點(diǎn)單克隆抗體偶聯(lián)物進(jìn)行分離的一種方法。同時(shí)還有基于瓊脂糖凝膠以及瓊脂糖-聚丙烯酰胺雜合凝膠電泳等的純化分離方法。總之,利用以上純化方法雖然可以獲得較**的量子點(diǎn)單克隆抗體偶聯(lián)物,但仍存在操作條件苛刻,流程復(fù)雜,得率低等缺陷,很難實(shí)現(xiàn)規(guī)模化生產(chǎn)。

 

ZnO量子點(diǎn)修飾嵌合性單克隆抗體

水溶性量子點(diǎn)是一種良好的納米熒光標(biāo)記材料,該材料通過與單克隆抗體、鏈霉親和素、蛋白A、蛋白G以及配體或受體分子偶聯(lián),可廣泛應(yīng)用于細(xì)胞標(biāo)記、活體細(xì)胞成像、活體動(dòng)物體內(nèi)熒光顯微成像以及免疫快速診斷等諸多領(lǐng)域。但是傳統(tǒng)的量子點(diǎn)單克隆抗體偶聯(lián)物純化方法存在操作條件苛刻,流程復(fù)雜,得率低以及很難實(shí)現(xiàn)規(guī)模化生產(chǎn)等缺陷。

[0006]本**的目的是提供一種操作簡(jiǎn)便、分離效率高、大批量純化水溶性量子點(diǎn)IgG類單克隆抗體的新方法,具體包括以下步驟:

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純化量子點(diǎn)與IgG類單克隆抗體偶聯(lián)物的方法,包括如下步驟:

(I)將水溶性羧基修飾的量子點(diǎn)活化,加入IgG類單克隆抗體溶液,調(diào)整溶液pH至7.0~9.0后,偶聯(lián)反應(yīng);

(2)偶聯(lián)反應(yīng)結(jié)束后,溶液中加入氨基葡萄糖封閉偶聯(lián)產(chǎn)物中量子點(diǎn)表面殘留的羧基,將反應(yīng)溶液PH值調(diào)整至弱酸性;

(3)高速離心,棄上清液,取沉淀。

步驟(3)后,還有將沉淀用含25%甘油,0.01% NaN3的0.05 mol/L pH 7.0~7.5

磷酸鹽緩沖液溶解步驟。

所用量子點(diǎn)為羧基化兩親聚合物修飾的水溶性羧基量子點(diǎn)。

所述步驟(1)中活化為將水溶性羧基修飾的量子點(diǎn)溶解于pH 5.0~6.0,0.05mol/L硼酸鹽緩沖液中,分別加入1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺以及N-羥基硫代琥珀酰亞胺,37°C反應(yīng)2小時(shí),活化量子點(diǎn)羧基。

1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺以及N-羥基硫代琥珀酰亞胺與量子點(diǎn)的摩爾比均為100~200:1,優(yōu)選為150:1 ;所述IgG類單克隆抗體與量子點(diǎn)的摩爾比為I~10:1 ;

偶聯(lián)反應(yīng)結(jié)束后,溶液中加入氨基葡萄糖至氨基葡萄糖終濃度為1.5~3%,充分混勻15~30分鐘;

步驟(2)中將反應(yīng)溶液pH值調(diào)整至弱酸性為將pH值調(diào)整至4.5~5.0,優(yōu)選為4.5 ; 步驟(3)所述高速離心離心力為28,000~30,000g。

所述IgG類單克隆抗體為抗黃曲霉毒素BI單克隆抗體、抗赭曲霉毒素單克隆抗體、抗玉米赤霉烯酮單克隆抗體、抗恩諾沙星單克隆抗體、抗鹽酸克倫特羅單克隆抗體、抗沙丁胺醇單克隆抗體、抗孔雀石綠單克隆抗體、抗萊克多巴胺單克隆抗體、抗沙門氏菌單克隆抗體、抗志賀氏菌單克隆抗體、或抗空腸彎曲菌單克隆抗體。

量子點(diǎn)修飾人源化單克隆抗體

MoS2單層量子點(diǎn)修飾全人源單克隆抗體

二硫化鉬單層量子點(diǎn)溶液

產(chǎn)品名稱

中文名稱: MoS2單層量子點(diǎn)溶液

英文名稱: Single layer MoS2 quantum dots

性質(zhì)

濃度: 0.5 mg/ml

粒徑:小于10nm

溶劑:水

穩(wěn)定劑:氫氧化鋰

PH: 8-9

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制備方法

MoS2量子點(diǎn)由鋰插層方法制備,制備后期離心去除大片徑二硫化鉬,量子點(diǎn)為主要成分,可能殘留部分納米片。插層法制備的量子點(diǎn)不發(fā)光,但是因?yàn)榫哂写罅康娜毕莺捅缺砻娣e,是電化學(xué)應(yīng)用的材料。

應(yīng)用領(lǐng)域

傳感檢測(cè)、光電器件、醫(yī)藥領(lǐng)域、潤(rùn)滑添加劑等。

保存條件

二硫化鉬量子點(diǎn)溶液請(qǐng)于4℃冷藏保存,需惰性氣體保護(hù),并于開封一周內(nèi)用完。二硫化鉬量子點(diǎn)粉末請(qǐng)于常溫干燥避光密封保存。

制備二硫化鉬量子點(diǎn)的方法包括機(jī)械剝離法(如研磨法)、化學(xué)合成法、化學(xué)氣象層積、激光消融、電子束刻蝕方法等

制備步驟:

一種二硫化鉬量子點(diǎn)的制備方法,包括以下步驟:(1)將二硫化鉬粉末分散在無水乙醇中;向該溶液中加入氫氧化鈉,氫氧化鈉加入量為0.5-3mg/ml,超聲混勻后得到混合溶液;(2)將步驟(1)所述混合溶液轉(zhuǎn)移至反應(yīng)釜中,密封,在100-200℃烘箱內(nèi)反應(yīng)3-24h,自然冷卻至室溫,過濾后收集所得濾液;(3)將步驟(2)所得濾液在透析袋中透析至中性,去除雜質(zhì)小分子,干燥后即得到二硫化鉬量子點(diǎn),該二硫化鉬量子點(diǎn)隨著激發(fā)光波長(zhǎng)的不同,二硫化鉬量子點(diǎn)的發(fā)射光波長(zhǎng)也不同,其中**激發(fā)波長(zhǎng)為370nm,此時(shí)的**熒光發(fā)射波長(zhǎng)為461nm,屬于可見光范圍。該操作簡(jiǎn)單,綠色環(huán)保,成本低,工藝條件易于實(shí)現(xiàn),所制備的二硫化鉬量子點(diǎn)具有優(yōu)良的分散性、水溶性和強(qiáng)的熒光性。在光電子器件、鋰離子電池、生物成像、光電催化等方面具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。但是反應(yīng)過程中需要?dú)溲趸c可以同時(shí)作為一種腐蝕、插層、剝離試劑,在腐蝕大尺寸二硫化鉬表面的同時(shí),插入其層與層之間,得到小尺寸二硫化鉬量子點(diǎn)。但是氫氧化鈉對(duì)環(huán)境污染比較大,并且需要采用聚四氟乙烯內(nèi)襯反應(yīng)釜反應(yīng),不利于大規(guī)模生產(chǎn),并且生產(chǎn)要求高。

溫馨提示:西安齊岳生物科技有限公司供應(yīng)的產(chǎn)品僅用于科研,不能用于人體和其他商業(yè)用途(ssl2021.11.11

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