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基于DSPE-PEG-RVG29修飾的MM/ANP納米平臺的合成與表征
發(fā)布時間:2025-06-27     作者:zyl   分享到:

文獻(xiàn):

Apelin-13-Loaded Macrophage Membrane-Encapsulated Nanoparticles for Targeted Ischemic Stroke Therapy via Inhibiting NLRP3 Inflammasome-Mediated Pyroptosis

文獻(xiàn)鏈接:https://www.tandfonline.com/doi/full/10.2147/IJN.S475915#graphical-abstract

作者:Chang-Sheng Ma,Ya-Ping Ma,Bo Han,Wan-Li Duan,Shu-Chen Meng,Min Bai

MM/ANP的制備

PLGA溶于二氯甲烷,APN溶于水,CY5.5溶于二氯甲烷。將三種物質(zhì)混合并超聲處理1分鐘,然后加入聚乙烯醇水溶液,再次超聲處理1 min。將混合物攪拌1小時以去除二氯甲烷,并在4000 rpm下離心5-10分鐘以去除上清液。用超純水洗滌沉淀物兩次,并重新懸浮在10mL中,以獲得PLGA納米顆粒的水溶液。隨后,將細(xì)胞膜均勻分散,并與PLGA-CCHO以1:1的質(zhì)量比混合用于混合超聲。加入DSPE-PEG-RVG29并孵育1小時以獲得MM/ANP。Cy5.5被連接到MM/ANP的表面進(jìn)行追蹤。納米顆粒儲存在-20°C下使用。

MM準(zhǔn)備

使用膜蛋白提取試劑盒(Beyotime,中國江蘇)從RAW264.7中提取MM。嚴(yán)格遵守試劑盒說明以獲得MM。MM濃度通過二辛可寧酸(BCA)蛋白測定法測定。MM囊泡在-80°C下儲存以備后續(xù)使用。

納米粒子表征

利用透射電子顯微鏡(TEM;Hitachi,Tokyo,Japan)觀察MM/ANP的形態(tài),并測定其粒徑、多分散指數(shù)(PDI)和ζ電位。使用粒度儀和ζ電位分析儀(NanoBook 90Plus PALS;Brookhaven,Holtsville)進(jìn)行粒徑、PDI和ζ電勢測量。

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