BSA-FITC（熒光素標記牛血清白蛋白）合成制備

中文名稱：FITC標記牛血清白蛋白
英文名稱：BSA-FITC（Bovine Serum Albumin-Fluorescein）
別名：FITC-BSA、熒光牛血清蛋白

供應商：西安齊岳生物科技有限公司

用途：科研

一、反應原理：

FITC（異硫氰酸熒光素）具有活潑的異硫氰酸基團，可與蛋白質(zhì)賴氨酸殘基的氨基反應，生成穩(wěn)定的硫脲鍵，從而將熒光團共價連接至蛋白上。

二、原料準備：

BSA：常用濃度為10 mg/mL，在0.1 M NaHCO?緩沖液中（pH 8.5）溶解；

FITC：在DMSO或乙醇中新鮮配制（常用濃度為1–10 mg/mL）；

緩沖液：0.1 M NaHCO?或PBS（pH 8.5）

三、合成步驟：

反應配比

按BSA與FITC摩爾比1:3~1:10配制反應體系（根據(jù)標記密度需求調(diào)整）；

在避光條件下緩慢滴加FITC至BSA溶液中，并輕微攪拌。

孵育反應

反應通常在4°C或室溫避光下進行4–12小時；

控制pH在8.0–8.5，有利于反應效率，防止蛋白質(zhì)變性。

純化處理

反應后需用透析袋（10 kDa）進行48小時透析，更換PBS緩沖液3–4次以去除游離FITC；

也可使用凝膠層析柱（如Sephadex G-25）進行分離。

檢測與儲存

用UV-VIS分光光度計測定FITC吸收峰（495 nm）與蛋白280 nm吸收比值，計算標記密度（FITC/BSA）；

建議冷凍（-20°C）避光保存，加入0.01% NaN?防止微生物污染。

四、應用與優(yōu)勢：

應用：

細胞攝取實驗：用于示蹤蛋白質(zhì)攝取與分布；

免疫組化：作為非特異性對照蛋白；

熒光成像：觀察蛋白質(zhì)運輸、血腦屏障通透性等；

載藥或納米材料示蹤：例如FITC-BSA納米粒；

優(yōu)勢：

熒光強度高，綠色可視化清晰；

BSA為天然蛋白，生物相容性優(yōu)；

標記工藝成熟，重復性強。

關于我們：

西安齊岳生物提供的熒光標記服務支持糖化學、蛋白質(zhì)、多肽、抗體、核酸及納米材料等多種生物分子的熒光化修飾?？商峁┒喾N熒光探針（如FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor系列、ICG等），根據(jù)應用場景（流式細胞、共聚焦、活體成像等）選擇合適波長及標記方式。服務包含標記反應、純化、標記率評估及質(zhì)量驗證，確保分子活性和信號強度。適用于細胞追蹤、分子成像、靶向驗證等研究，亦可提供定制熒光強度、pH響應或近紅外探針功能化服務。

以上資料由小編zhn提供，僅用于科研

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