巨噬細胞清除劑--氯膦酸鹽脂質體(Clodronate Liposomes)的實驗方法
脂質體是用于遞送治療劑和診斷劑的*廣泛使用的納米載體平臺,已被批準用于臨床實踐。氯膦酸鹽(也稱為二氯亞甲基二膦酸鹽)可被細胞代謝以阻斷線粒體呼吸,因為形成了不可水解的 ATP 類似物,然后導致細胞死亡(細胞凋亡)。氯膦酸鹽通過包埋在脂質體中的形式注射后,巨噬細胞吞噬氯膦酸鹽脂質體并消化脂質體膜。氯膦酸鹽不被消化,會保留在巨噬細胞內。隨著更多的氯膦酸鹽攝入和消化更多的氯膦酸鹽脂質體,更多的氯膦酸脂質體會在巨噬細胞內積聚。在一定的細胞內濃度下,氯膦酸鹽將通過啟動程序性細胞死亡(即凋亡)來清除巨噬細胞。由于所氯膦酸鹽和脂質體磷脂對其他非吞噬細胞都沒有毒性,因此這種方法允許特異性消耗已經存在的吞噬巨噬細胞。
西安齊岳生物公司提供的巨噬細胞清除劑--氯膦酸鹽脂質體(Clodronate Liposomes)可有效清除動物體內不同組織部位和血液中的巨噬細胞。
不同組織巨噬細胞清除的實驗方法
靶向器官/細胞 | 實驗方法 | 靶向器官/細胞 |
脾臟/紅髓區巨噬細胞 | 單次給藥:200 μL/小鼠(靜脈注射或腹腔注射)長期耗竭:第一次給藥150 μL/小鼠,之后每隔兩周給藥100 μL/小鼠 | 脾臟/紅髓區巨噬細胞 |
肝臟/Kupffer細胞 | 單次給藥:200 μL/小鼠(靜脈注射或腹腔注射)長期耗竭:第一次給藥劑量150 μL/小鼠,以后按照兩周一次給藥100 μL/小鼠 | 肝臟/Kupffer細胞 |
肺/肺泡巨噬細胞 | 靜脈注射(150-200 μL)聯合氣管或鼻內(50 μL)給藥獲得*佳效果 | 肺/肺泡巨噬細胞 |
淋巴結 | 注射(100-200 μL)/小鼠,具體給藥方式可參考文獻 | 淋巴結 |
腦/小膠質細胞 | 腦室腦脊液注射,10 μL/小鼠,50 μL/大鼠 | 腦/小膠質細胞 |

氯膦酸鹽脂質體處理人血管內皮細胞(HUVEC)和巨噬細胞(J774A.1)(A)24 h(B)48h后細胞活力測定
氯磷酸鹽脂質體被巨噬細胞吞噬后,在溶酶體的作用下釋放出氯磷酸鹽,氯磷酸鹽累積到一定量會對細胞產生不可逆性損傷,導致巨噬細胞凋亡。從圖中可以看出,巨噬細胞J774A.1清除一半時的有效藥物濃度對正常細胞HUVEC幾乎沒有損傷。兩種細胞對藥物的敏感程度相差在10個數量級。