DSPE-PEG-NH2 MW:2000制備脂質體的步驟詳解！

以下是DSPE-PEG-NH?（MW:2000）用于制備脂質體的詳細步驟，適用于靶向修飾型長循環脂質體（如藥物遞送、納米載體設計）：

一、材料準備

1. 必備原料

磷脂主成分：如 HSPC（卵磷脂）、DSPC 或 Egg-PC；

膽固醇：調節膜流動性；

DSPE-PEG2000-NH?：提供親水性和表面功能化修飾能力；

有機溶劑：氯仿/甲醇（體積比 2:1）；

水相溶劑：PBS 或去離子水；

藥物或負載物（可選）；

超聲儀、旋轉蒸發器、擠出裝置等儀器設備。

二、脂質體制備步驟詳解（薄膜水化-擠出法）

步驟 1：脂質溶液配制

按摩爾比配制脂質混合物，如：

HSPC：膽固醇：DSPE-PEG2000-NH? = 65:30:5（mol/mol/mol）；

將脂質溶解在氯仿/甲醇混合溶劑中；

可加入脂溶性藥物一同溶解（如紫杉醇等）；

室溫超聲10分鐘使混合均勻。

步驟 2：旋轉蒸發形成脂質膜

將混合脂質溶液轉移至圓底燒瓶；

用旋轉蒸發儀（溫度 40–50?°C，真空）緩慢蒸干溶劑；

形成均勻的干脂質膜于燒瓶內壁上；

可置于真空干燥箱中繼續抽干2–4小時，去除殘余有機溶劑。

步驟 3：水化脂質膜

用適量 PBS（pH 7.4）或緩沖液加入脂質膜中；

37?°C水浴下緩慢旋轉或震蕩 30 分鐘水化，使脂質膜剝落形成多層脂質體（MLVs）；

可加入親水性藥物于水化緩沖液中（如阿霉素）。

步驟 4：均質處理

使用超聲處理或擠出（通過聚碳酸酯膜）以控制粒徑：

推薦用擠出器依次通過 400 nm、200 nm、100 nm 濾膜 10 次；

得到粒徑均一的單層小脂質體（SUVs）；

可檢測 Zeta 電位、粒徑分布（如 DLS）。

步驟 5：功能化與純化

若 DSPE-PEG-NH? 作為表面功能基團用于進一步修飾（如與靶向分子、熒光標記物結合）：

可通過后修飾法使用 NHS 活性酯、EDC/NHS 化學連接；

若脂質體中含游離藥物或未反應物，可采用透析法、超濾或凝膠柱（如 Sephadex G-50）進行純化。

三、關鍵技術參數建議

四、備注與提示

DSPE-PEG2000-NH?具有親水PEG鏈和脂溶尾部，可嵌入脂質體雙層并將氨基暴露于表面；

氨基基團可與活性酯反應偶聯靶向分子如葉酸、抗體、適配體、熒光探針；

若不需要偶聯修飾，可直接用于提高循環穩定性、減少蛋白吸附（stealth effect）；

建議制備后立即使用，或在 4?°C 避光儲存。