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綠色熒光蛋白GFP的結構以及發光特性
發布時間:2021-02-25     作者:zl   分享到:

綠色熒光蛋白(GFP)是一種能夠發出綠色熒光的蛋白質,它存在于維多利亞多管水母體內。發現維多利亞多管水母(A. victoria)可以發出藍綠色的光。在研究,他們從維多利亞多管水母(A. victoria)中分離純化出水母素,同時還發現了維多利亞多管水母(A. victoria)體內有綠色熒光蛋白存在。在1963年,發現鈣離子可以增強水母素的發光,在進一步的研究中從維多利亞多管水母(A. victoria)分離純化出GFP的晶體。而且還發現在沒有GFP存在時,水母素能夠發出很弱的藍色熒光,波長為470 nm;鈣離子和水母素結合后,將能量傳遞給GFP,導致GFP在紫外光下發出綠色熒光,波長為509 nm

1、熒光蛋白結構以及發光特性

GFP結構

  一級結構:GFP的生色團位于6469的六肽內,更準確的說是6567殘基(野生型GFP中是Ser-Try-Gly)生成的4-(-羥基苯亞甲基)咪唑-5-啉酮。圖一為生色集團形成機制

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1:生色團形成機制

  晶體機構:綠色熒光蛋白晶體的立體結構是由11條β桶裝結構繞成的一個圓柱體,一條α螺旋纏繞在圓柱體的軸位置。生色團附著在α螺旋上,幾乎完美地包埋于圓柱體中心。這種方式被稱為β罐(圖2)

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2:GFP的三維結構

GFP發光特性

  對GFP的氨基酸序列和發光特性進行研究,結果不表明:水母素要將能量傳遞給GFP后才可以讓GFP發出綠色的熒光;GFP則能夠在藍光的激發下,直接發出綠色熒光

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