提供一種小鼠活體成像的實驗流程和實驗步驟

西安齊岳生物科技有限公司在整體動物實驗服務，動物造模實驗，動物體內光學成像，實驗動物飼養及造模服務、細胞周期測試、細胞凋亡測試、藥動學實驗外包等方面有豐富的經驗。提供多種小鼠，大鼠，兔子等動物的活體成像，為您定制**的實驗方案。

小鼠活體成像的實驗流程：

1. 制作動物模型：

可根據實驗需要通過尾靜脈注射、皮下移植、原位移植等方法接種已標記的細胞或組織。在建模時應認真考慮實驗目的和選擇熒光標記，如標記熒光波長短，則穿透效率不高，建模時不宜接種深部臟器和觀察體內轉移，但可以觀察皮下瘤和解剖后臟器直接成像。深部臟器和體內轉移的觀察大多選用熒光素酶標記。 

2. 活體成像：

小鼠經過常規（氣麻、針麻皆可）后放入成像暗箱平臺，軟件控制平臺的升降到一個合適的視野，自動開啟照明燈（明場）拍攝一次背景圖。下一步，自動關閉照明燈，在沒有外界光源的條件下（暗場）拍攝由小鼠體內發出的特異光子。明場與暗場的背景圖疊加后可以直觀的顯示動物體內特異光子的部位和強度，完成成像操作。值得注意的是熒光成像應選擇合適的激發和發射濾片，生物發光則需要成像前體內注射底物激發發光。 

3. 數據處理：

小動物活體成像圖像處理軟件除了提供含有光子強度標尺的成像圖片外，還能計算分析發光面積、總光子數、光子強度的相關參數供實驗者參考。

下面提供一種小鼠活體成像的實驗步驟：
1).SPF級 BALB/C裸鼠，6～8 周齡，18～20克，實驗前24 h 自由進食、飲水。
2).于實驗裸鼠腹腔內注射2%戊巴比妥鈉300μL(215 mg/ kg)動物。將裸鼠俯臥位平放于小動物多光譜活體成像系統的記錄暗箱中。實驗時將Cy7或Cy7標記的生物分子或**溶于水(或甲醇/乙醇/乙二醇，有時DMSO 200uL能把小鼠殺死)稀釋后，于裸鼠尾靜脈注射200μL(濃度0.5 mg/mL)[用量和時間需要客戶根據自己的儀器和**試劑等條件優化]。每5min 記錄1 張動物在體內發射熒光的成像圖片，分析熒光**的分布情況。對照鼠不注射**，進行同時記錄。記錄結束后迅速解剖裸鼠的心、肝、脾、肺、腎等臟器，進行成像。
3).Cy7 檢測時激發波長700～770 nm帶通，發射波長790 nm長通。液晶可調諧濾光片掃描范圍 780～950 nm，掃描步進10 nm。曝光時間為500 ms。

結果說明：

不同的**代謝時間不一樣，注射入裸鼠體內，熒光立即分布全身，然后逐步向膀胱聚集，呈現**的腎排泄的特點一般4～6小時，快的只有30分鐘;如果是骨骼和鼻腔等部位靶點的Cy7標記**，有客戶反映一周后活體成像系統仍能檢測到熒光成像。器官切片觀察：將解剖的器官迅速放置于4%多聚甲醛固定4小時以上，0%，20%，30%PBS蔗糖依次沉底，20μm切片，多聚賴氨酸洗過的載玻片貼片，晾干，DAPI染色。共聚焦顯微鏡觀察，激光器為氦氖 633 nm。

西安齊岳生物提供以下定制服務項目列表：

●**代謝動學參數分析

●大小鼠高脂血癥模型造模

●大小鼠I型糖尿病模型造模

●大鼠脊髓損傷模型造模

●肝細胞代謝穩定性試驗

●基因芯片分析

●藥代體外的吸收、分布、代謝和排泄研究

●藥動代謝物鑒別/分析

●細胞誘導/分化實驗外包

●血漿動力學檢測

●組織分布研究

●細胞毒性實驗

●細胞增殖與活性實驗

●創傷性關節軟骨損傷修復動物模型●基因敲除技術

●藥代動力學體外安全性評價

●血漿蛋白結合率測定

●血漿穩定性試驗

●肝微粒體代謝試驗

●CYP450**試驗

●CYP450誘導試驗

●代謝產物推測

●代謝產物確證

●代謝途徑的推測

●代謝途徑的確證

●跨膜轉運試驗

●**-**相互作用

●代謝表型研究

以上資料來自西安齊岳生物小編zhn2020.12.15